🐟 (@stevessr) 在 利用重叠寡核苷酸的分子自组装实现DNA片段的高通量合成 中发帖
https://www.nature.com/articles/s41587-026-03266-2
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DNA合成技术的局限性是合成生物学发展中的一个根本瓶颈。本文提出了一种基于杂交的高通量基因合成方法,称为分子自组装诱导克隆(MSAI)。MSAI通过将体外重叠DNA片段的正交自组装与体内宿主细胞的DNA修复机制相结合,克服了基因间的分子串扰和寡核苷酸错配问题。组装后的靶片段被细胞摄取,作为回收和克隆的模板。我们采用基于微芯片的寡核苷酸合成技术,能够在简单的单步反应中合成超过1000种不同的基因片段。近乎零错配是该平行合成方法不可或缺的特性,寡核苷酸合成误差保持在恒定且可控的水平。此外,我们还构建了工业酶PETase的大量变体库,并发现了比标准酶活性更高的变体。